| 產(chǎn)品名稱 |
人髓母細(xì)胞瘤組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4283 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術(shù)后的髓母細(xì)胞瘤組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
髓母細(xì)胞瘤(medulloblastoma)由Bailey 與Cushing 于1925 年首先報(bào)道，是好發(fā)于兒童的 顱內(nèi)惡性腫瘤，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性程度最高的神經(jīng)上皮性腫瘤之一有人認(rèn)為其發(fā)生是由于 原始髓樣上皮未繼續(xù)分化的結(jié)果。這種起源于胚胎殘余細(xì)胞的腫瘤可發(fā)生在腦組織的任何部 位，但絕大多數(shù)生長在第四腦室頂之上的小腦蚓部。髓母細(xì)胞瘤的細(xì)胞形態(tài)很象胚胎期的髓 母細(xì)胞，因此采用了這個名稱。在人胚胎中僅見于后髓帆，這與好發(fā)于小腦蚓部相符合。亦 認(rèn)為它是起源于原始細(xì)胞胚胎細(xì)胞殘余。髓母細(xì)胞瘤占膠質(zhì)瘤的8.2%，多見于兒童，男女 之比為2:1。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要病生理變化 |
髓母細(xì)胞瘤柔軟易碎，邊界略可辯認(rèn)。切面呈灰紅色，較大的腫瘤中央常有壞死。腫瘤 絕大多數(shù)位于小腦蚓部。突入第四腦室并常侵犯第四腦室底。從第四腦室，腫瘤阻塞導(dǎo)水管 及第四腦室出口，引起腦積水。髓母細(xì)胞有沿蛛網(wǎng)膜下腔彌漫轉(zhuǎn)移的傾向。腫瘤鄰近的軟腦 膜常被浸潤，在腦表面形成一層乳白色膠樣組織。腫瘤可轉(zhuǎn)移到椎管內(nèi)及大腦表面，或沿腦 室播散到第三腦室底。 |
